J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y O n e x p o s u r e t o L C - 5 0 o f c a d m i u m c h l o r i d e , O p h i o c e p h a l a u s p u n c t a t u s a l t e r s t h e p h y s i c o c h e m i c a l p a r a m e t e r s o f w a t e r K e y w o r d s : C a d m i u m , P h y s i c o - c h e m i c a l p a r a m e t e r , f i s h . A B S T R A C T : C a d m i u m i s h i g h l y t o x i c t o a q u a t i c b i o t a a n d s e v e r e l y a l t e r s t h e b i o c h e m i c a l , p h y s i o l o g i c a l a n d h i s t o p a t h o l o g i c a l a s p e c t s o f o r g a n i s m s . I t a l s o i n d u c e s t h e c h a n g e i n p h y s i c o - c h e m i c a l p a r a m e t e r s o f w a t e r . I t i s o b s e r v e d t h a t t h e C a d m i u m c h l o r i d e g r a d u a l l y i n c r e a s e s t h e p H , c o n d u c t i v i t y , f r e e c a r b o n d i o x i d e a n d t o t a l a l k a l i n i t y o f w a t e r f r o m 2 4 h r s t o 4 8 h r s o f e x p o s u r e t o O p h i o c e p h a l u s p u n c t a t u s . H o w e v e r t h e t e m p e r a t u r e a n d d i s s o l v e d o x y g e n s h o w e d n o a p p r e c i a b l e c h a n g e s a s t o o u r e x p e c t a t i o n . I t h a s b e e n c o n c l u d e d t h a t t h e i n c r e a s e i n p H , c o n d u c t i v i t y c o u l d b e d u e t o e x c r e t i o n o f n e g a t i v e l y c h a r g e d i o n s b y t h e f i s h . I n c r e a s e i n f r e e c a r b o n d i o x i d e m i g h t b e d u e t o h i g h m e t a b o l i c r a t e , t o t a l a l k a l i n i t y a s c a l c i u m c a r b o n a t e c o u l d b e t h e r e s u l t o f c a l c i u m e x c r e t i o n a n d f o r m a t i o n o f c a l c i u m c a r b o n a t e a f t e r c o m p l e x c h e m i c a l r e a c t i o n . 1 1 9 - 1 2 4 | J R B | 2 0 1 2 | V o l 2 | N o 2 © F i c u s P u b l i s h e r s . T h i s O p e n A c c e s s a r t i c l e i s g o v e r n e d b y t h e C r e a t i v e C o m m o n s A t t r i b u t i o n L i c e n s e ( h t t p : / / c r e a t i v e c o m m o n s . o r g / l i c e n s e s / b y / 2 . 0 ) , w h i c h g i v e s p e r m i s s i o n f o r u n r e s t r i c t e d u s e , n o n - c o m m e r c i a l , d i s t r i b u t i o n , a n d r e p r o d u c t i o n i n a l l m e d i u m , p r o v i d e d t h e o r i g i n a l w o r k i s p r o p e r l y c i t e d . S u b m i t Y o u r M a n u s c r i p t w w w . f i c u s p u b l i s h e r s . c o m w w w . j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m J o u r n a l o f R e s e a r c h i n b i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O p e n A c c e s s O n l i n e R e s e a r c h J o u r n a l A u t h o r s : S w a p a n S . B a c h e r a n d A r u n M . C h i l k e . I n s t i t u t i o n : D i v i s i o n o f T o x i c o l o g y a n d B i o m o n i t o r i n g , D e p a r t m e n t o f Z o o l o g y , S h r e e S h i v a j i A r t s , C o m m e r c e a n d S c i e n c e C o l l e g e , R a j u r a - 4 4 2 9 0 5 ( I n d i a ) . C o r r e s p o n d i n g a u t h o r : S w a p a n S . B a c h e r . E m a i l : a c h i l k e . 2 0 1 1 @ r e d i f f m a i l . c o m . W e b A d d r e s s : h t t p : / / j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m / D o c u m e n t s / R A 0 1 8 8 . p d f . D a t e s : R e c e i v e d : 1 7 J a n 2 0 1 2 / A c c e p t e d : 2 7 J a n 2 0 1 2 / P u b l i s h e d : 2 2 F e b 2 0 1 2 A r t i c l e C i t a t i o n : S w a p a n S . B a c h e r a n d A r u n M . C h i l k e . O n e x p o s u r e t o L C - 5 0 o f c a d m i u m c h l o r i d e , O p h i o c e p h a l a u s p u n c t a t u s a l t e r s t h e p h y s i c o c h e m i c a l p a r a m e t e r s o f w a t e r . J o u r n a l o f r e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 : 1 1 9 - 1 2 4 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O n l i n e O p e n A c c e s s P u b l i c a t i o n g r o u p O r i g i n a l R e s e a r c h

I N T R O D U C T I O N : H e a v y m e t a l s f r o m i n d u s t r i e s d i s t u r b t h e a q u a t i c e n v i r o n m e n t a n d l e a d s t o e n v i r o n m e n t a l h e a l t h h a z a r d s ( S h u k l a e t a l . , 2 0 0 7 ; G u p t a a n d S r i v a s t a v a , 2 0 0 6 ; A g t a s e t a l . , 2 0 0 7 ; Y o o n e t a l . , 2 0 0 8 ) . A m o n g t h e h e a v y m e t a l s , c a d m i u m i s c o n s i d e r e d a s a m a j o r a q u a t i c p o l l u t a n t i n m a n y p a r t s o f t h e w o r l d a n d h a s b e e n r e p o r t e d t o e x e r t d e l e t e r i o u s e f f e c t s i n t e r m s o f n e p h r o t o x i c , c y t o t o x i c , g e n o t o x i c , i m m u n o t o x i c a n d c a r c i n o g e n i c ( A M A P . 1 9 9 8 ; L i p p m a n n . 2 0 0 0 a n d R i s s o d e - f a v e r n e y , 2 0 0 1 ) . T h e r e a r e m a n y s t u d i e s c o n c e r n w i t h t h e t o x i c i t y o f c a d m i u m o n v e r t e b r a t e s a n d i n v e r t e b r a t e s ( R a s m u s s e n a n d A n d e r s e n , 2 0 0 0 , A d a m i e t a l , 2 0 0 2 a n d F i l i o v i c a n d R a s p o r , 2 0 0 3 ) . F i s h e x p o s e d t o h i g h c o n c e n t r a t i o n o f c a d m i u m q u i c k l y d e v e l o p l a c k o f c a l c i u m a n d l o w b l o o d h e m o g l o b i n . M i c r o o r g a n i s m s m a y s u f f e r g r o w t h i n h i b i t i o n a t c a d m i u m c o n c e n t r a t i o n o f 0 . 2 5 m g / l ( R o b e r t s , 2 0 0 3 ) . B i o c h e m i c a l a n d p h y s i o l o g i c a l b i o m a r k e r s a r e f r e q u e n t l y u s e d f o r d e t e c t i n g o r d i a g n o s i n g s u b l e t h a l e f f e c t s i n f i s h e x p o s e d t o d i f f e r e n t t o x i c s u b s t a n c e s ( T h e o d o r a k i s e t a l . , 1 9 9 2 ) . A l t h o u g h m a n y a s p e c t s r e l e v a n t t o c a d m i u m t o x i c i t y o n v a r i e t y o f a n i m a l s w e r e c a r r i e d o u t ( Z e l l o k o f e t a l . , 1 9 9 5 ; W o o d l i n g e t a l . , 2 0 0 1 ; A r o c k i a r a j a n d H a n i f f i a , 2 0 0 4 ; M a h e s h w a r a n e t a l . , 2 0 0 8 a n d V e s e y , 2 0 1 0 ) b u t s t i l l v e r y i n s u f f i c i e n t w o r k h a s b e e n d o n e t o e v a l u a t e t h e c h a n g e i n d u c t e d b y h e a v y m e t a l s i n p h y s i c o c h e m i c a l p a r a m e t e r s o f w a t e r i n r e l a t i o n t o f i s h . I n t h e p r e s e n t s t u d y t h e a t t e m p t w a s m a d e t o c o r r e l a t e t h e e f f e c t o f c a d m i u m o n O p h i o c e p h a l u s p u c t a t u s i n r e l a t i o n t o a l t e r n a t i o n i n p h y s i c o c h e m i c a l c h a r a c t e r i s t i c s o f w a t e r . M A T E R I A L S A N D M E T H O D S H e a l t h y f i n g e r l i n g s o f O p h i o c e p h a l u s p u c t a t u s m e a s u r i n g t h e s i z e 1 2 - 1 5 c m w e r e p u r c h a s e d f r o m f i s h e r m a n o f M u l c h e r a ( D i s t r i c t - G a d c h i r o l i ) . I t w a s c a r r i e d t o t h e l a b o r a t o r y i n h y g i e n i c c o n d i t i o n a n d a c c l i m a t i z e d f o r f i f t e e n d a y s . D u r i n g t h i s p e r i o d o f a c c l i m a t i z a t i o n f i s h w e r e f e d w i t h b o i l e d e g g s a n d r i c e b r a n . C a d m i u m L C - 5 0 f o r 9 6 w a s c a r r i e d o u t t h r i c e t o c o n f i r m e x a c t d o s e o f L C - 5 0 . T h e n t h e f i s h w e r e d i v i d e d i n t o s i x g r o u p s . E a c h g r o u p w a s c o n t a i n e d t w e n t y f i s h e a c h . L a t e r a l l t h e s e f i s h w e r e e x p o s e d t o l e t h a l c o n c e n t r a t i o n o f c a d m i u m f o r 2 4 , 4 8 , 7 2 a n d 9 6 h r s . T h e e s t i m a t i o n o f w a t e r w a s c a r r i e d o u t a t t h e i n t e r v a l o f 2 4 h r s a f t e r r e a l s t a r t t i m e . A l l t h e p h y s i c o c h e m i c a l p a r a m e t e r s w e r e t e s t e d a c c o r d i n g t o A P H A ( 1 9 8 9 ) . V a l u e s w e r e c a l c u l a t i o n b y u s i n g s o f t w a r e o r g i n - 5 0 a n d f i g u r e s w e r e p r e p a r e d w i t h t h e h e l p o f M i c r o s o f t E x c e l a n d A d o b e P h o t o s h o p - 7 . R E S U L T S : C a d m i u m a n o n - e s s e n t i a l t o x i c h e a v y m e t a l i n d u c e s t h e b e h a v i o r a l c h a n g e s a n d a l t e r s t h e p h y s i c o c h e m i c a l p r o p e r t i e s o f w a t e r ( T a b l e - 1 ) O p h i o c e p h a l u s p u c t a t u s e x h i b i t e d s u d d e n c h a n g e i n i t s b e h a v i o r a f t e r e x p o s u r e t o l e t h a l c o n c e n t r a t i o n o f C a d m i u m . I t b e c a m e m o r e a c t i v e a n d s t a r t e d t o m o v i n g f a s t , t a k i n g j u m p . O p e r c u l a r m o v e m e n t w a s i n c r e a s e d . V e r t i c a l m o v e m e n t a t a n g l e o f 6 0 w a s m o s t s t r i k i n g B a c h e r e t a l . , 2 0 1 2 1 2 0 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 : 1 1 9 - 1 2 4 S r . N o . P a r a m e t e r s 2 4 - H r s 4 8 - H r s 7 2 - H r s 9 6 H r s . 1 A m b i e n t T e m p . 2 5 . 5 ° C 2 5 ° C 2 5 ° C 2 5 ° C 2 W a t e r T e m p . 2 3 . 8 ° C 2 3 . 9 ° C 2 4 . 1 ° C 2 3 ° C 3 p H 6 . 1 7 ± 0 . 0 0 8 6 . 2 4 ± 0 . 0 0 4 6 . 2 8 ± 0 . 0 0 6 6 . 6 1 ± 0 . 0 0 8 4 C o n d u c t i v i t y 0 . 2 4 9 ± 0 . 0 0 2 0 . 3 1 1 ± 0 . 0 0 3 0 . 3 5 2 ± 0 . 0 0 4 0 . 3 6 1 ± 0 . 0 0 2 5 F r e e C O 2 1 0 . 0 1 ± 0 . 0 4 0 1 2 . 3 6 ± 0 . 1 3 1 3 . 4 4 ± 0 . 0 6 9 1 5 . 5 4 ± 0 . 1 5 6 D i s s o l v e d O 2 0 . 7 3 ± 0 . 0 2 1 0 . 2 7 ± 0 . 0 3 3 0 . 4 3 ± 0 . 0 3 3 0 . 4 7 ± 0 . 0 2 1 7 T o t a l A l k a l i n i t y 1 5 . 5 ± 0 . 3 4 2 1 . 5 ± 0 . 5 2 3 . 8 3 ± 0 . 4 0 2 8 . 3 3 ± 0 . 6 1 T a b l e - 1 . E f f e c t o f C a d m i u m ( L C - 5 0 ) o n P h y s i c o c h e m i c a l P a r a m e t e r s o f W a t e r

b e h a v i o r a m o n g s t t h e s e f i s h . B u t a f t e r o n e a n d h a l f h o u r t h e y b e c a m e a c c l i m a t e d a n d s t a r t e d s h o w i n g n o r m a l b e h a v i o r . T e m p e r a t u r e o f w a t e r i n c r e a s e d f r o m 2 4 t o 7 2 h r s . T h e l o w e s t t e m p e r a t u r e ( 2 3 ° C ) w a s n o t i c e d a t t h e e n d o f 9 6 h r s . A m b i e n t t e m p e r a t u r e w a s s l i g h t l y h i g h a t t h e f i r s t 2 4 h o u r s a n d l a t e r i t w a s c o n s t a n t ( F i g . 1 ) . N e g a t i v e l o g a r i t h m i c h y d r o g e n i o n c o n c e n t r a t i o n i n c r e a s e d c o n t i n u o u s l y f r o m 2 4 t o 9 6 h o u r s o f e x p o s u r e ( F i g . 2 ) . M a x i m u m p H ( 6 . 6 1 ± 0 . 0 0 8 ) w a s n o t i c e d o n f o u r t h d a y ( 9 6 h r s ) o f e x p o s u r e a n d m i n i m u m ( 6 . 1 7 ± 0 . 0 0 8 ) o n f i r s t d a y ( 2 4 h r s ) . S i m i l a r l y , t h e c o n d u c t i v i t y ( F i g . 3 ) o f w a t e r w a s i n c r e a s e d f r o m 2 4 t o 9 6 h r s , t h e m a x i m u m c o n d u c t i v i t y ( 0 . 3 6 1 ± 0 . 0 0 2 ) w a s o b s e r v e d a t 9 6 h r s . a n d l o w e s t a t 2 4 h r s ( 0 . 2 4 9 ± 0 . 0 0 2 ) . M a x i m u m d i s s o l v e d o x y g e n ( F i g . 5 ) w a s o b s e r v e d a t 2 4 h r s ( 0 . 7 3 ± 0 . 0 2 1 m g / l ) a n d l o w e s t a t t h e s e c o n d d a y ( 4 8 h r s , 0 . 2 7 ± 0 . 0 3 3 m g / l ) . T h e r e w a s n o c o n s i s t e n c y i n d e c r e a s e w a s o b s e r v e d a t 7 2 a n d 9 6 h r s . H o w e v e r , t h e f r e e c a r b o n d i o x i d e c o n s i s t e n t l y i n c r e a s e s ( F i g . 4 ) f r o m 4 8 t o 9 6 h r s . T h e m i n i m u m f r e e c a r b o n d i o x i d e w a s r e c o r d e d a t 2 4 h r s ( 1 0 . 0 1 ± 0 . 0 4 0 m g / l ) a n d m a x i m u m w a s a t t h e e n d o f e x p e r i m e n t a t i o n ( 9 6 h r s , 1 5 . 5 4 ± 0 . 1 5 m g / l ) . T o t a l a l k a l i n i t y ( F i g . 6 ) a s c a l c i u m c a r b o n a t e w a s m a x i m u m o n f o u r t h d a y o f e x p o s u r e ( 9 6 h r s , 2 8 . 3 3 ± 0 . 6 1 m g / l ) a n d m i n i m u m a t t h e f i r s t d a y ( 9 6 h r s , 1 5 . 5 ± 0 . 3 4 m g / l ) . F r o m t h e f i r s t d a y o f e x p o s u r e t h e t o t a l a l k a l i n i t y g r a d u a l l y i n c r e a s e d u p t o 9 6 h r s . D I S C U S S I O N : T h e s t u d y o n p h y s i c o c h e m i c a l c h a r a c t e r i s t i c s o f f r e s h w a t e r , m a r i n e w a t e r a n d p o l l u t e d w a t e r h a d b e e n d o n e b y m a n y a u t h o r s a l l o v e r t h e w o r l d b u t i n s i g n i f i c a n t d a t a i s a v a i l a b l e o n t h e a l t e r n a t i o n o f p h y s i c o c h e m i c a l c h a r a c t e r i s t i c s o f w a t e r a f t e r e x p o s u r e o f f i s h t o t h e h e a v y m e t a l s . T h e r e f o r e t h e p r e s e n t s t u d y w a s c a r r i e d o u t t o e x p l o r e v a r i a t i o n i n p h y s i c o c h e m i c a l c h a n g e s o f w a t e r a f t e r e x p o s u r e o f O p h i o c e p h a l u s p u n c t a t u s t o t h e C a d m i u m c h l o r i d e . O . p u n c t a t u s i s a f r e s h w a t e r s n a k e h e a d a b u n d a n t l y p r e s e n t i n W a r d h a R i v e r a n d i n t h e p o n d s o f C h a n d r a p u r a n d G a d c h i r o l i d i s t r i c t s . I t i s a l i v e f i s h a n d s u r v i v e s i n o x y g e n d e f i c i t w a t e r . H o w e v e r t h e p h y s i c o c h e m i c a l p a r a m e t e r s a f f e c t t h e s u r v i v a l o f f i s h e s b y m a n y a s p e c t s . I n t h e p r e s e n t s t u d y t h e a t t e m p t h a d b e e n m a d e t o e x p l o r e t h e c h a n g e i n p h y s i c o c h e m i c a l p a r a m e t e r o f w a t e r i n r e s p o n s e t o e f f e c t o f C a d m i u m C h l o r i d e o n O . p u n c t a t u s . B a c h e r e t a l . , 2 0 1 2 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 : 1 1 9 - 1 2 4 1 2 1 T i m e i n H o u r s C h a n g e i n p H F i g . 2 . S h o w i n g c h a n g e i n p H ( l o g a r i t h m i c h y d r o g e n i o n c o n c e n t r a t i o n ) d u r i n g t h e e x p e r i m e n t f r o m 2 4 h r s t o 9 6 h r s u p o n e x p o s u r e o f O p h i o c e p h a l a u s p u n c t a t u s t o C a d m i u m L C - 5 0 . p H o f W a t e r T e m p e r a t u r e i n c e l c i u s F i g . 1 . S h o w i n g t h e d i f f e r e n c e i n A m b i e n t a n d W a t e r T e m p e r a t u r e d u r i n g t h e e x p e r i m e n t f r o m 2 4 h r s t o 9 6 h r s u p o n e x p o s u r e o f O p h i o c e p h a l a u s p u n c t a t u s t o C a d m i u m L C - 5 0 . C h a n g e i n A m b i e n t a n d w a t e r T e m p e r a t u r e T i m e i n H o u r s

T h e a m b i e n t t e m p e r a t u r e a l t e r s t h e w a t e r t e m p e r a t u r e . D u r i n g w i n t e r s e a s o n t h e a t m o s p h e r i c a n d w a t e r t e m p e r a t u r e i s a l w a y s l o w . F i s h e s a r e p o i k i l o t h e r m i c a n i m a l s a n d g r a d u a l l y a d j u s t i t s b o d y t e m p e r a t u r e w i t h t h e i r s u r r o u n d i n g . T h e t e m p e r a t u r e o f w a t e r i n c r e a s e d a s c o m p a r e d t o a t m o s p h e r i c t e m p e r a t u r e c o u l d b e d u e t o i n c r e a s e i n b a s a l m e t a b o l i c r a t e o f f i s h . A t 9 6 h r s o f e x p o s u r e t h e w a t e r t e m p e r a t u r e r e d u c e d m i g h t b e d u e t o s u d d e n d r o p i n m e t a b o l i c r a t e . H y d r o g e n i o n c o n c e n t r a t i o n ( p H ) a f f e c t s t h e g r o w t h a n d r e p r o d u c t i v e c a p a b i l i t y o f f i s h . T h e p H o f w a t e r g r a d u a l l y c h a n g e d f r o m t h e f i r s t d a y o f e x p o s u r e t i l l 9 6 h r s . T h i s i n c r e a s e c a n b e a t t r i b u t e d t o t h e l o s s o f p r o t o n s b y t h e f i s h . T h e c a d m i u m i s t o x i c t o t h e f i s h e v e n a t s u b - l e t h a l c o n c e n t r a t i o n ; i t h a s b e e n o b s e r v e d t h a t t h e c a d m i u m w o u l d h a v e i n d u c i n g t h e l o s s o f p r o t o n s i n f i s h . T h e c o n d u c t i v i t y o f w a t e r i s d e p e n d s u p o n t h e t o t a l a m o u n t o f d i s s o l v e d i o n s . T h e i n c r e a s e i n w a t e r c o n d u c t i v i t y f r o m 2 4 h r s o f e x p o s u r e t o 9 6 h r s c a n b e i m p l i c a t e d t o t h e g r a d u a l a c c r e t i o n o f i o n i c s t r e n g t h i n t h e w a t e r . T h e c a d m i u m c o u l d h a v e i n d u c e d t h e l o s s o f i o n s b y t h e f i s h b y d i s t u r b i n g t h e m e t a b o l i s m . B a c h e r e t a l . , 2 0 1 2 1 2 2 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 : 1 1 9 - 1 2 4 T i m e i n H o u r s F r e e C a r b o n D i o x i d e m g / 1 C h a n g e i n F r e e C a r b o n D i o x i d e F i g . 4 . S h o w i n g v a r i a t i o n i n F r e e C a r b o n d i o x i d e i n w a t e r f o m 2 4 h r s t o 9 6 h r s u p o n e x p o s u r e o f O p h i o c e p h a l a u s p u n c t a t u s t o C a d m i u m L C - 5 0 . F i g . 5 . S h o w i n g a l t e r n a t i o n i n D i s s o l v e d O x y g e n i n w a t e r d u r i n g t h e e x p e r i m e n t f r o m 2 4 h r s t o 9 6 h r s u p o n e x p o s u r e o f O p h i o c e p h a l a u s p u n c t a t u s t o C a d m i u m L C - 5 0 . T i m e i n H o u r s D i s s o l v e d O x y g e n m g / 1 C h a n g e i n D i s s o l v e d O x y g e n F i g . 6 . S h o w i n g c h a n g e i n T o t a l A l k a l i n i t y i n w a t e r d u r i n g t h e e x p e r i m e n t f r o m 2 4 h r s t o 9 6 h r s u p o n e x p o s u r e o f O p h i o c e p h a l a u s p u n c t a t u s t o C a d m i u m L C - T i m e i n H o u r s C h a n g e i n T o t a l A l k a l i n i t y a s C a c o 3 A l k a l i n i t y m g / 1 F i g . 3 . S h o w i n g c h a n g e i n W a t e r C o n d u c t i v i t y f r o m 2 4 h r s t o 9 6 h r s u p o n e x p o s u r e o f O p h i o c e p h a l a u s p u n c t a t u s t o C a d m i u m L C - 5 0 . C h a n g e i n W a t e r C o n d u c t i v i t y W a t e r C o n d u c t i v i t y T i m e i n H o u r s

A C K N O W L E D G E M E N T : A u t h o r s a r e v e r y t h a n k f u l t o M r . D . B . B h o n g d e , P r i n c i p a l , S h r e e S h i v a j i A r t s , C o m m e r c e a n d S c i e n c e C o l l e g e , R a j u r a ( M . S . ) f o r p r o v i d i n g t h e l a b o r a t o r y f a c i l i t i e s . R E F E R E N C E S : A d a m i G M , B a r b i e r i P , F a b i a n i M , P i s e l l i S , P r e d o n z a n i S a n d R e i s e n h o f e r E . 2 0 0 2 . L e v e l s o f c a d m i u m a n d z i n c i n h e p a t o p a n c r e a s o f r e a r e d M y t i l u s g a l l o p r o v i n c i a l i s f r o m t h e G u l f o f T r i e s t e ( I t a l y ) . C h e m o s p h e r e 4 8 : 6 7 1 - 6 7 7 . A g t a s , S e m s e t t i n , H u s e y i n G e y a n d S u l e y m a n G u l . 2 0 0 7 . C o n c e n t r a t i o n s o f h e a v y m e t a l s i n w a t e r a n d c h u b , L e u c i s c u s c e p h a l u s ( L i n n . ) f r o m t h e r i v e r Y i l d i z , T u r k e y . J . E n v i r o n . B i o l . , 2 8 : 8 4 5 - 8 4 9 . A M A P . 1 9 9 8 . A s s e s s m e n t r e p o r t : A r c t i c p o l l u t i o n i s s u e s . A r c t i c M o n i t o r i n g a n d A s s e s s m e n t P r o g r a m m e , O s l o . A P H A . 1 9 8 9 . S t a n d a r d m e t h o d s f o r e x a m i n a t i o n o f w a t e r a n d w a s t e w a t e r . A m e r i c a n p u b l i c h e a l t h a s s o c i a t i o n , W a s h i n g t o n D C ) . A r o c k i a r a j A J a n d H a n i f f a M A . 2 0 0 4 . C y c l i c a l c h a n g e s i n g o n a d a l m a t u r a t i o n a n d h i s t o l o g i c a l o b s e r v a t i o n o f t h r e a t e n e d f r e s h w a t e r c a t f i s h N a r i k e l i r u M y s t u s m o n t a n u s . A c t a I c h t h y o l o g i c a l E T P i s c a t o r i a 3 4 ( 2 ) : 2 5 3 - 2 6 6 . F i l i p o v i c V a n d R a s p o r B . 2 0 0 3 . M e t a l l o t h i o n e i n a n d m e t a l l e v e l s i n c y s t o l o f l i v e r , k i d n e y a n d b r a i n i n r e l a t i o n t o g r o w t h p a r a m e t e r s o f M u l l u s s u r m u l e t u s a n d L i z a a u r a t a . F r o m t h e E a s t e r n A d r i a t i c S e a . W a t e r R e s e a r c h . 3 7 : 3 2 5 3 - 3 2 6 2 . G u p t a , P a l l a v i a n d N e e r a S r i v a s t a v a . 2 0 0 6 . E f f e c t s o f s u b - l e t h a l c o n c e n t r a t i o n s o f z i n c o n h i s t o l o g i c a l c h a n g e s a n d b i o a c c u m u l a t i o n o f z i n c b y k i d n e y o f f i s h , C h a n n a p u n c t a t u s ( B l o c h ) . J . E n v i r o n . B i o l . , 2 7 : 2 1 1 - 2 1 5 . L i p p m a n n M . 2 0 0 0 . H u m a n e x p o s u r e s a n d t h e i r h e a l t h e f f e c t s . I n : E n v i r o n m e n t a l T o x i c a n t s ( 2 n d E d i t i o n ) W i l e y I n t e r s c i e n c e s . U S A . 8 2 4 - 8 2 9 . M a h e s h w a r a n R , D e v a p a u l A , M u r l i d h a r a n S , V e l m u r u g a n B a n d I g n a c i m u t h u S . 2 0 0 8 . H a e m a t o l o g i c a l S t u d i e s o f f r e s h w a t e r f i s h , C l a r i a s b a t r a c h u s ( L ) \ . ) e x p o s e d t o m e r c u r i c c h l o r i d e . I n t . J . I n t . B i o l . , 2 ( 1 ) : 5 0 - 5 5 . R a s m u s s e n A D a n d A n d e r s e n O . 2 0 0 0 . E f f e c t s o f c a d m i u m e x p o s u r e o n v o l u m e r e g u l a t i o n i n t h e l u g w o r m , A r e n i c o l a m a r i n a . A q u a t i c t o x i c o l o g y 4 8 : 1 5 1 - 1 6 4 . R i s s o - d e - f a v e r n e y C , D e v a u s A , L a f a u r i e M , G i r a r d J P , B a i l l y B a n d R a h m a n i R . 2 0 0 1 . C a d m i u m i n d u c e s a p o p t o s i s a n d g e n o t o x i c i t y i n r a i n b o w t r o u t h e p a t o c y t e s t h r o u g h g e n e r a t i o n o f r e a c t i v e o x y g e n s p e c i e s . A q u a t i c T o x i c o l . A m s t e r d a m . 5 3 ( 1 ) : 6 5 - 7 6 . R o b e r t s M . 2 0 0 3 . R e v i e w o f r i s k s f r o m m e t a l s i n t h e U K . C h e m i c a l S t a k c h o l d e r F o r u m , F o u r t e e n t h m e e t i n g 2 0 . S h u k l a , V i n e e t a , M o n i k a D h a n k h a r , J a i P r a k a s h a n d K V S a s t r y . 2 0 0 7 . B i o a c c u m u l a t i o n o f Z n , C u a n d C d i n C h a n n a p u n c t a t u s . J . E n i v r o n . B i o l . , 2 8 : 3 9 5 - 3 9 7 . T h e o d o r a k i s C W , D ' S u r n e y S J , B i c k h a m J W , L y n e T B , B a r d l e y B P , H a w k i n s W E , F a r k a s W L , M c . C a r t h y J F a n d S h u g a r t L R . 1 9 9 2 . E c o t o x i c o l o g y 1 : 4 5 - 7 3 ( c i t e d f r o m d e l a T o r r e e t a l . , 1 9 9 8 ) . T h o m a s D G , S o l b e J F , d e L G , K a y J a n d C r y e r A . 1 9 8 3 . E n v i r o n m e n t a l c a d m i u m i s n o t s e q u e s t e r e d b y m e t a l l o t h i o n e i n i n r a i n b o w t h r o u t . B i o c h e m . A n d B i o p h y s i c . R e s . C o m m u n i . , 1 1 0 : 5 8 4 - 5 9 2 . V e s e y D A . 2 0 1 0 . T r a n s p o r t p a t h w a y s f o r c a d m i u m i n t h e i n t e s t i n e a n d k i d n e y p r o x i m a l t u b u l e : F o c u s o n t h e i n t e r a c t i o n w i t h e s s e n t i a l m e t a l s . T o x i c o l . L e t t e r s , 1 9 8 ( 1 ) : 1 3 - 1 9 . B a c h e r e t a l . , 2 0 1 2 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 : 1 1 9 - 1 2 4 1 2 3

B a c h e r e t a l . , 2 0 1 2 1 2 4 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 : 1 1 9 - 1 2 4 W o o d l i n g J D , B r i n k m a n S F , H o r n B J . 2 0 0 1 . N o n u n i f o r m a c c u m u l a t i o n o f c a d m i u m a n d c o p p e r i n k i d n e y s o f w i l d b r o w n t r o u t S a l m o t r u t t a p o p u l a t i o n s . A r c h . E n v i r o n . C o n t a m . T o x i c o l . , 4 0 : 3 8 1 - 3 8 5 . Y o o n , S e o k j o o , S a n g - S e o p H a n a n d R a n a S V S . 2 0 0 8 . M o l e c u l a r m a r k e r s o f h e a v y m e t a l t o x i c i t y - A n e w p a r a d i g m f o r h e a l t h r i s k a s s e s s m e n t . J . E n v i r o n . B i o l . , 2 9 : 1 - 1 4 . Z e l l k o f J T , B r w s e r D , S q u i b b K S a n d F r e n k e l K . 1 9 9 5 . I m m u n o t o x i c i t y o f l o w l e v e l c a d m i u m e x p o s u r e i n f i s h : a n a l t e r n a t i v e a n i m a l m o d e l f o r i m m u n o t o x i c o l o g i c a l s t u d i e s . J . T o x i c o l . E n v i r o n . H e a l t h 4 5 ( 3 ) : 2 3 5 - 4 8 . S u b m i t y o u r a r t i c l e s o n l i n e a t F i c u s p u b l i s h e r s . c o m A d v a n t a g e s E a s y o n l i n e s u b m i s s i o n C o m p l e t e P e e r r e v i e w A f f o r d a b l e C h a r g e s Q u i c k p r o c e s s i n g E x t e n s i v e i n d e x i n g O p e n A c c e s s a n d Q u i c k s p r e a d i n g Y o u r e t a i n s y o u r c o p y r i g h t s u b m i t @ f i c u s p u b l i s h e r s . c o m w w w . f i c u s p u b l i s h e r s . c o m / s u b m i t 1 . a s p x .